Uusi koronaviruksen (SARS-Cov-2) nukleiinihappojen tunnistussarja

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flumalmiscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Uusi koronaviruksen (SARS-Cov-2) nukleiinihappojen tunnistuspakkaus (fluoresoiva RT-PCR-koetinmenetelmä)

【Packaging specifications 】25 testiä/sarja

【Intended usikä】

Tätä sarjaa käytetään uuden koronaviruksen aiheuttaman nukleiinihapon kvalitatiiviseen havaitsemiseen nenänielun vanupuikoista, suunielun (kurkun) vanupuikoista, nenän etuosan vanupuikoista, keskiturbinaa olevista vanupuikoista, nenähuuhteluista ja nenän aspiraatioista henkilöiltä, ​​joiden terveydenhuollon toimittaja epäilee COVID19:n. Uuden koronaviruksen ORF1ab- ja N-geenien havaitsemista voidaan käyttää uuden koronavirusinfektion apudiagnostiikkaan ja epidemiologiseen seurantaan.

【Principles of the proisidure 】

Tämä pakkaus on suunniteltu erityisille TaqMan-koettimille ja erityisille alukkeille, jotka on suunniteltu uudelle koronaviruksen (SARS-Cov-2) ORF1ab- ja N-geenisekvensseille. PCR-reaktioliuos sisältää 3 sarjaa spesifisiä alukkeita ja fluoresoivia koettimia kohteiden spesifiseen havaitsemiseen, ja lisäsarjaa spesifisiä alukkeita ja fluoresoivia koettimia käytetään sarjan sisäisenä standardikontrollina endogeenisten taloudenhoitogeenien havaitsemiseen.

Testin periaate on, että spesifinen fluoresoiva koetin pilkkoutuu ja hajoaa Taq-entsyymin eksonukleaasiaktiivisuuden vaikutuksesta PCR-reaktiossa siten, että fluoresoiva reportteriryhmä ja sammutettu fluoresoiva ryhmä erotetaan toisistaan, jolloin fluoresenssin seurantajärjestelmä voi vastaanottaa fluoresoivan signaalin. signaali, ja sitten PCR-vahvistuksen rikastusvaikutuksen kautta koettimen fluoresenssisignaali saavuttaa asetetun kynnysarvon - Ct-arvon (Cycle threshold). Jos kohdeamplikonia ei ole, koettimen reportteriryhmä on lähellä sammutusryhmää. Tällä hetkellä tapahtuu fluoresenssiresonanssienergian siirto, ja sammutusryhmä sammuttaa reportteriryhmän fluoresenssin, joten fluoresoiva PCR-laite ei pysty havaitsemaan fluoresoivaa signaalia.

Jotta reagenssien käyttöä voidaan seurata testin aikana, pakkaus on varustettu positiivisilla ja negatiivisilla kontrolleilla: positiivinen kontrolli sisältää kohdealueen rekombinanttiplasmidin ja negatiivinen kontrolli on tislattu vesi, jota käytetään ympäristön saastumisen seurantaan. Testattaessa on suositeltavaa asettaa positiivinen ja negatiivinen kontrolli samanaikaisesti.

【Main components 】

Huom：(1) Eri eräsarjojen komponentteja ei voi sekoittaa tai vaihtaa keskenään.

(2) Valmista oma reagenssisi: Nukleiinihapon uuttosarja.

【Storage conditions ja expiration date 】

For BST-SARS-25:Kuljeta ja säilytä -20±5 ℃ pitkään.

For BST-SARS-DR-25:Kuljetus huoneenlämmössä. Säilytä -20±5 ℃ pitkään.

Vältä toistuvia pakastus-sulatusjaksoja. Voimassaoloaika on alustavasti asetettu 12 kk.

Katso etiketistä valmistus- ja käyttöpäivämäärä.

Ensimmäisen avaamisen jälkeen reagenssia voidaan säilyttää -20±5 °C:ssa enintään 1 kuukauden ajan tai reagenssijakson loppuun saakka, sen mukaan kumpi päivämäärä tulee ensin, jotta vältetään toistuvat jäädytys-sulatusjaksot ja reagenssien jäätymiskertojen lukumäärä. -sulatusjaksot eivät saa ylittää 6 kertaa.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1.Soveltuva näytetyyppi: Uutettu nukleiinihappoliuos.

2.Näytteiden säilytys ja kuljetus: Säilytä -20±5 ℃ 6 kuukautta. Pakasta ja sulata näytteet enintään 6 kertaa.

【Testing method】

1.Nucleic acid extraction

Valitse sopiva nukleiinihapon uuttosarja virusnukleiinihapon uuttamiseksi ja noudata vastaavan pakkauksen ohjeita. On suositeltavaa käyttää Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd:n valmistamaa nukleiinihappojen uutto- ja puhdistussarjaa tai vastaavaa nukleiinihappojen puhdistussarjaa.

2.  Reaction reagent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Poista SARS-Cov-2 Mix ja Enzyme Mix, sulata täysin huoneenlämpötilassa, sekoita huolellisesti Vortex-laitteella ja sentrifugoi sitten hetken.

(2) 16,5 ul entsyymiseosta lisättiin 358,5 ul:aan SARS-Cov-2-seosta ja sekoitettiin perusteellisesti, jotta saatiin sekoitettu reaktioliuos.

(3) Valmistele puhdas 0,2 ml:n PCR-oktaaliputki ja merkitse se 15 ul:lla yllä olevaa sekoitettua reaktioliuosta kuoppaa kohti.

(4) Lisää 15 μl puhdistettua nukleiinihappoliuosta, positiivinen kontrolli ja negatiivinen kontrolli ja peitä varovasti oktaaliputken korkki.

(5) Sekoita hyvin kääntämällä ylösalaisin ja sentrifugoi nopeasti nesteen keskittämiseksi putken pohjalle.

1